海洋微生物几丁质酶菌株筛选及培养条件

地球上每年都会产生大量的几丁质,产生的同时又被微生物迅速降解,这一发现渐渐被人类关注后,开发几丁质资源成为了世界热潮。几丁质酶可作用于几丁质,使之分解成几丁寡糖或N-乙酰氨基葡萄糖(NAG)而被广泛应用于制取氨基寡糖素、植物病原真菌的生物防治、及抗病转基因植物的构建等方面,因而对产几丁质酶菌株的筛选、产酶发酵条件等的研究一直备受人们的关注。海洋环境的特殊性造就了海洋微生物及其代谢产物的多样性,是人们寻找与发现活性物质产生菌的重要场所。本实验从大连金石滩凉水湾海区潮间带采集海水、海泥、海壳作为样品,从中筛选出一株几丁质酶高产菌株N-32,并对其进行了初步鉴定,确定该菌株为弧菌属。本次实验对影响菌株N-32产酶的单因素进行了实验分析,为提高菌株的产酶能力,还对培养基组分及培养条件进行了优化。经优化该菌株最佳产酶的培养基组成为:0.5%胶体几丁质,1.5%甘露醇,0.3%蛋白胨,0.1%酵母膏,40%陈海水,60%蒸馏水,最佳培养条件为:培养基初始pH6,4%接种量,45ml/100ml装液量,在26℃下,130r/min培养8d。在最适产酶发酵条件下,菌体产几丁质酶的活性达0.43U/ml,比优化前提高了4.9倍。实验表明,通过使用DPS数据处理系统对实验结果进行分析大大提高了实验的简便性和准确性,且使用二次多项式逐步回归分析,对优化的拟合性很高,预测准确。

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